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本制品可以mRNA或者总RNA为模板，高效合成第一链cDNA。本制品含有反转录反应所需的全部试剂（BalbScript Reverse Transcriptase，RNase Inhibitor，Oligo(dT)₁₈，Random N6，dNTPs），浓度为2×。反应时只需要加入RNA模板和水即可，操作简单，减少操作过程中的污染。合成的第一链cDNA可直接用于PCR或荧光定量PCR的模板，第二链cDNA的合成或线性RNA扩增，也可用于需要用带有放射性或非放射性核苷酸标记第一链cDNA的实验。

• 本制品中使用的BalbScript Reverse Transcriptase无RNase H活性，可避免第一链cDNA合成过程中，RNA/DNA杂交模板链中RNA降解，保证了cDNA合成质量。
  
• 本制品中Random N6和Oligo(dT)18引物比例经过优化，可均匀合成样品中的cDNA。
  
• 操作简单，只需要加入RNA模板和水即可完成反应体系配制，降低了操作过程中的污染机会。

• 用DEPC处理实验用到的所有实验器材，或购买已经证明无核酸酶的实验用具，实验过程戴手套并经常更换手套，避免RNA酶的污染。
  
• 确保所用试剂中无RNA酶污染。
  
• 试剂盒要严格密封保存。在反转录过程中，所有管子确保扣严。
  
• 纯化过的RNA必须保证不含有盐，金属离子，乙醇和苯酚，以上成分会干扰第一链cDNA合成反应。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。
  
• 为保证反转录反应有效进行，需使用高质量的RNA模板。
  
• 有实验结果提示，本反转录酶可在15分钟内完成1kb反转录反应。

• 按顺序加入以下反应物：
  

  成分		用量
  模板RNA	总RNA	0.1ng～5μg
  	poly(A) mRNA	10pg
  	特异性RNA	0.01pg
  2×BalbScript 1st Strand cDNA Synthesis Supermix		10μL
  RNase-Free Water		至20μL

  
  可选步骤：如果RNA模板GC含量高或者含有二级结构，可先将RNA模板和RNase Free Water混匀后，65℃孵育5分钟（有助于打开高级结构，便于下一步反应的进行），迅速置于冰上冷却，再加入其它组分。
  
• 轻轻混匀，离心。
  
• 42℃孵育15～30分钟（如果RNA模板中不含poly A结构，25℃先孵育5分钟，随后42℃孵育15～30分钟）。
  
• 产物可直接用于下一步反应。如果不立即使用，可于-20℃保存一周，长时间保存建议-70℃放置。